Suolaliuokset ovat yleisiä, kun puhumme solubiologiasta tai biokemiasta. Pääasiassa kokeiden aikana tarvitaan suolaliuoksia. Kaksi yleistä suolaliuosta ovat PBS ja HBSS. Niiden saamiseksi käytetään tiettyjä ainesosia ja kemikaaleja. Vaikka molemmat sijoitetaan petrimaljoihin kennoineen, niissä on silti eroja.
PBS vs HBSS
Ero PBS:n ja HBSS:n välillä on, että PBS-suolaliuosta käytetään biokemian ja molekyylibiologian kokeissa, kun taas HBSS:ää käytetään yleisessä biologisessa tutkimuksessa. Vaikka molemmat ovat suolaliuoksia ja auttavat ylläpitämään neutraalia pH:ta, ne on valmistettu erilaisista ainesosista.
PBS tarkoittaa fosfaattipuskuroitua suolaliuosta. Se on vesipohjainen puskurisuolaliuos, joka auttaa pitämään näytteen pH-tason vakiona. Tämän liuoksen pH-taso on noin 7,4. PBS on luonteeltaan isotoninen eikä ole myrkyllinen useimmille soluille.
HBSS tulee sanoista Hank’s Balanced Salt Solution. Se on nestemäinen tai jauhemainen liuos, jota käytetään ylläpitämään osmolaliteettia ja pH-tasoja biologisissa sovelluksissa. Ne ovat myös vastuussa solujen lyhytaikaisesta ylläpidosta kasvualustan ulkopuolella. HBSS koostuu useista elektrolyyteistä, joita löytyy solunsisäisistä ja solunulkoisista osastoista.
Vertailutaulukko PBS:n ja HBSS:n välillä
| Vertailuparametrit | PBS | HBSS |
| Tarkoittaa | Fosfaattipuskuroitua suolaliuosta | Hankin tasapainoinen suolaliuos |
| Ainesosat | NaCl, KCl, Na2HPO4, KH2PO4. | Epäorgaaniset suolat, glukoosi tai pyruvaatti, fenolipunainen ja natriumbikarbonaatti. |
| Lomakkeet | Valmistettu vain nestemäisessä muodossa. | Voidaan valmistaa sekä nesteenä että jauheena. |
| Säilytyslämpötila | 15-30 astetta | 4-8 astetta. |
| Sovellukset | solujen pesu, kudoksen kuljettaminen, solujen laimentaminen ja reagenssien valmistus. | Nisäkässoluviljelmä, kuljetusalusta |
Mikä on PBS?
PBS tarkoittaa fosfaattipuskuroitua suolaliuosta. Se on vesipohjainen puskurisuolaliuos, joka auttaa pitämään näytteen pH-tason vakiona. PBS-liuosten vedenkorkeus ja ionipitoisuudet vastaavat ihmiskehoa, mikä tarkoittaa, että PBS-liuokset ovat luonteeltaan isotonisia.
Koska PBS-liuokset eivät ole myrkyllisiä soluille, niillä on monia sovelluksia, mukaan lukien aineen laimentaminen ja paakkuuntuneiden solujen irrottaminen jne. Viime vuosina PBS-liuokset ovat olleet erittäin kysyttyjä, koska niitä käytetään vaihtoehtona viruksen kuljetusväliaineelle RNA:n varastoinnissa. virukset, mukaan lukien SARS-CoV-2 tai Corona Virus.
PBS-liuos voidaan valmistaa eri menetelmillä. Jos puskuria käytetään elävään kudokseen, valmiste tarvitsee kaliumkloridia tai magnesiumkloridia, kun taas jos puskuria käytetään kiinteään kudokseen, kaliumkloridia tai magnesiumkloridia ei tarvita. Valmistuksen aikana pH-tasoa voidaan säätää suolahapolla tai natriumhydroksidilla.
PBS-liuoksen yleisimpiä ainesosia ovat NaCl, KCl, Na2HPO4, ja KH2PO4 tarkasti lasketuissa määrissä. PBS-liuoksia voidaan valmistaa myös käyttämällä kaupallisesti valmistettuja PBS-puskuritabletteja tai -kapseleita. PBS-liuokset säilytetään joko huoneenlämmössä tai jääkaapissa.
Mikä on HBSS?
HBSS tulee sanoista Hank’s Balanced Salt Solution. Tämä liuos on nimetty biologi John H. Hanksin mukaan, joka formuloi ne vuonna 1940. Tätä liuosta käytetään puskurijärjestelmänä soluviljelmässä ja se auttaa ylläpitämään optimaalisia pH-tasoja tai solujen kasvua. Optimaaliset pH-arvot ovat 7,0 - 7,4.
Koska HBBS-liuokset sisältävät glukoosia ja natriumbikarbonaattia, niitä käytetään lyhytaikaiseen solujen ylläpitoon kasvualustan ulkopuolella. Näitä liuoksia käytetään myös erilaisiin soluviljelysovelluksiin, kuten solujen pesuun, solujen kuljettamiseen tai solujen laimentamiseen. Kalsiumin ja magnesiumin kanssa muodostettuja HBSS-liuoksia käytetään kuljetusväliaineina tai reagenssin valmistukseen.
HBSS-liuos valmistetaan jauhemaisesta peruselatusaineesta, joka on yhdistetty viljelylaatuisen kudosveden kanssa. HBSS-liuoksen yleisiä ainesosia ovat epäorgaaniset suolat, glukoosi tai pyruvaatti, fenolipunainen ja natriumbikarbonaatti. Valmistuksen jälkeen HBSS-liuosnäytteet testataan bakteeri- tai sienikontaminaation puuttumisen varmistamiseksi
HBSS-liuokset ovat herkkiä ja toimitetaan gammasäteilytetyissä, steriileissä pulloissa. HBSS-liuokset säilytetään matalassa 4-8 celsiusasteen lämpötilassa ja suojassa suoralta valolta. Niitä on myös vaarallisempi valmistaa verrattuna PBS-liuoksiin, koska ihmissoluissa on biologisesti vaarallisia aineita.
Tärkeimmät erot PBS:n ja HBSS:n välillä
Johtopäätös
Sekä PBS että HBSS ovat suolaliuoksia, joita käytetään enimmäkseen molekyylibiologiassa, biokemiallisissa kokeissa ja biologisten lääkkeiden tutkimuksessa. Kokeen aikana molemmat liuokset asetetaan petrimaljaan solun tai kudoksen kanssa. Liuos pitää solut paikallaan tutkimuksen aikana tai käytettäväksi kokeen aikana. Vaikka nämä kaksi ovat erillisiä suolaliuoksia, niitä voidaan käyttää myös vaihtokelpoisina edullisissa olosuhteissa. Tällaisissa tapauksissa, jos näyte kuitenkin tarvitaan jauheena, poimitaan HBSS-liuos, koska PBS-liuos on vain nestemäisessä muodossa.
PBS:ää valmistetaan enimmäkseen laboratorioissa, koska ainesosien koostumusta voidaan tarvittaessa muuttaa ja se on myös turvallista, sillä PBS-liuos ei vaikuta haitallisesti soluihin. HBSS-liuosta sen sijaan suositaan suoraan markkinoilta, koska sitä on vaarallista valmistaa laboratoriossa sen herkkyys ja mahdollinen bakteeri- tai sienikontaminaatio huomioon ottaen. Lisäksi suotuisten olosuhteiden saavuttaminen vaatii enemmän resursseja, koska sitä voidaan säilyttää vain alhaisessa lämpötilassa.
Vaikka näiden molempien suolaliuosten perustarkoitus on sama, PBS:n vaatimukset ovat kasvaneet viime vuosina, koska sitä voidaan käyttää viruksen kuljetusalustana RNA-virusten, mukaan lukien Corona-viruksen, varastoinnissa.
